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一、系統(tǒng)簡介
實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)主要用于運(yùn)行實(shí)時熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，通過熒光激發(fā)和采集的方式，對實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行實(shí)時監(jiān)控，將實(shí)驗(yàn)過程數(shù)據(jù)繪制成熒光曲線，實(shí)時呈現(xiàn)于儀器顯示界面，并對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合和分析，最后可生成PDF格式的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
對取于其他動物體內(nèi)的生物樣本（如血液，體液等）中包含的目標(biāo)核酸，進(jìn)行快速精準(zhǔn)的定性和定量分析，同時也能夠?qū)μ厥鈽颖具M(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線，熔解曲線，基因分型等分析。
二、基本原理
實(shí)時熒光定量PCR儀器的原理：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA擴(kuò)增，由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個溫度循環(huán)周期，使目的基因得以迅速擴(kuò)增，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便、省時等特點(diǎn)，是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新。PCR技術(shù)可將極微量的目標(biāo)DNA特異地?cái)U(kuò)增上百萬倍，從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。
實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入相應(yīng)的熒光染料或熒光標(biāo)記探針，在PCR反應(yīng)過程中通過熒光信號變化，對整個PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時檢測，以熒光化學(xué)物質(zhì)監(jiān)測每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法，通過內(nèi)參或外參的方法對待測樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。
三、應(yīng)用領(lǐng)域
◆食源性致病菌檢測
◆動植物源性檢測
◆植物科學(xué)與農(nóng)業(yè)生物技術(shù)
◆基因突變及多態(tài)性
◆基礎(chǔ)科學(xué)研究
◆水體監(jiān)測
◆病原核酸檢測
◆ 轉(zhuǎn)基因檢測
◆動物疫情監(jiān)測
◆食品衛(wèi)生檢疫
◆海關(guān)進(jìn)出口檢疫
四、儀器基本結(jié)構(gòu)
實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)是實(shí)時檢測反應(yīng)的儀器，主要由基因擴(kuò)增熱循環(huán)系統(tǒng)、熒光實(shí)時檢測系統(tǒng)、微電路控制系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)及應(yīng)用軟件組成。其中兩個核心功能模塊：熱循環(huán)系統(tǒng)和熒光實(shí)時檢測系統(tǒng)。其中基因擴(kuò)增熱循環(huán)系統(tǒng)工作原理與傳統(tǒng)基因擴(kuò)增儀工作原理基本相同，采用半導(dǎo)體加熱制冷工作方式完成熱循環(huán)過程。熒光檢測系統(tǒng)主要有由熒光激發(fā)部件、光信號傳輸部件、熒光檢測部件、控制系統(tǒng)組成。
五、儀器特點(diǎn)
1、體積小，重量輕，方便攜帶，兼容0.2PCR單管、八聯(lián)管;
2、采用美國MARLOW定制型帕爾貼模塊高級別半導(dǎo)體芯片，新一代半導(dǎo)體升降溫技術(shù)，最快變溫速率可達(dá)每秒7度，使用壽命可達(dá)一百萬次循環(huán);
3、采用采光檢測處理技術(shù)，自動調(diào)節(jié)熒光本底，提高熒光信號靈敏度和信噪比，獲得更佳結(jié)果;
4、13S四通道快速采光，熒光采集信號穩(wěn)定，減少延時誤差;
5、采用免維護(hù)的長壽命LED光源，無需更換，獨(dú)立熒光通道，不同通道之間的串?dāng)_更小;
6、 恒流式控制電路，功率輸出平滑，延長 Peltier壽命，提高控溫精度;
7、具有過流、過溫、瞬時斷電數(shù)據(jù)自恢復(fù)等保護(hù)功能，儀器重啟后繼續(xù)運(yùn)行未完成實(shí)驗(yàn)，確保實(shí)驗(yàn)安全運(yùn)行;
8、強(qiáng)大的軟件分析功能，可以進(jìn)行定量分析，熔解曲線分析，基因分型等，分析軟件免費(fèi)升級，支持不同行業(yè)的軟件定制;
9、支持恒溫、熒光定量雙模式，適配市面上多數(shù)的恒溫PCR試劑盒和熒光定量PCR試劑盒;
10、自帶10寸彩色觸摸屏控制，也可以連接電腦控制。
六、儀器技術(shù)指標(biāo)
“///” 符號表示國家標(biāo)準(zhǔn)目前沒有定義該項(xiàng)指標(biāo)或者強(qiáng)制性要求。
指標(biāo)名稱 | H160 | H320 | H480 | |
外觀 | ||||
外形尺寸 | 235mm*385mm*175mm（寬*深*高） | |||
重量 | 5.6kg | 5.7kg | 5.8Kg | |
電氣參數(shù) | ~220V/50Hz，255W | |||
數(shù)據(jù)接口 | USB 2.0 *2（右側(cè)兩個） | |||
環(huán)境參數(shù) | ||||
運(yùn)行條件 | 溫度：10-30℃，濕度：20%~80% | |||
運(yùn)輸及貯存條件 | 溫度：-20~55℃，濕度：20%~80% | |||
海拔高度 | <2500米 | |||
噪聲等級 | A計(jì)權(quán)，<60dB | |||
樣本參數(shù) | ||||
樣本容量 | 16*0.2mL | 32*0.2mL | 48*0.2mL | |
試管類型 | 單管，八聯(lián)排試管 | |||
樣本容積 | 15-100uL | |||
溫度特性 | ||||
加熱/冷卻方式 | 半導(dǎo)體加熱/制冷 | |||
溫度范圍 | 4℃-99℃ | |||
最大升溫速率 | ≥5.5℃/s | |||
平均升溫速率 | ≥3.5℃/s | |||
最大降溫速率 | ≥4.5℃/s | |||
平均降溫速率 | ≥2.5℃/s | |||
控溫精度 | ≤±0.01℃ | |||
溫度準(zhǔn)確度 | ≤±0.1℃ | |||
溫度均勻性 | ≤±0.3℃ | |||
光學(xué)特性 | ||||
熒光檢測通道數(shù) | 4通道 | |||
發(fā)光器件 | 高亮度LED | |||
采光器件 | 高靈敏度，高信噪比光電二極管 | |||
適配探針或染料 | 第一通道：470/520 FAM,SYBR Green | |||
第二通道：530/570 HEX,JOE,VIC | ||||
第三通道：580/610 ROX,CY3.5,Texas-Red | ||||
第四通道：630/670 CY5 | ||||
檢測靈敏度 | 1個拷貝 | |||
線性檢測范圍 | 100~1010個拷貝 | |||
線性相關(guān)系數(shù) | ≥0.999 | |||
通道交叉串?dāng)_ | 無串?dāng)_ | |||
檢測重復(fù)性 | ≤1.0% | |||
參考資料
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